LB 培养基是分子生物学、微生物实验最常用的细菌通用液体培养基,全称 Luria-Bertani 培养基,主要用来培养大肠杆菌等革兰阴性菌,是质粒扩增、菌液活化、克隆筛选的基础培养基,优点是配制简单、细菌生长速度快,属于实验室标配培养基,注意它不是选择性培养基,本身不带抗性,需要额外添加抗生素才能做筛选。
基础组分对照表
| 成分 | 作用 | 常规含量(1L) |
|---|---|---|
| 胰蛋白胨 Tryptone | 提供氮源、氨基酸 | 10 g |
| 酵母提取物 Yeast extract | 提供维生素、微量元素 | 5 g |
| 氯化钠 NaCl | 维持渗透压 | 10 g |
| 琼脂粉(可选) | 做成固体平板 | 15~20 g |
深度原理讲解
- 命名:Luria-Bertani,简称 LB,很多人会误以为 LB 是 Luria Broth,也就是卢里亚肉汤,这个是俗称,正式名称是 Luria-Bertani 培养基。
- 分类:
- LB 液体培养基:没有琼脂,用于摇菌扩培、菌液培养
- LB 固体平板:加入琼脂,倒平板,用于单菌落分离、抗性筛选
- pH:配制完成后一般调 pH 到 7.0~7.4,适合大肠杆菌生长,配制完成必须高压蒸汽灭菌,121℃ 20 分钟。
- 拓展:如果需要抗性筛选,灭菌冷却到 50℃左右,再加入氨苄青霉素、卡那霉素这类抗生素,高温会让抗生素失效,不能和培养基一起高压灭菌。
- 适用范围:主要培养大肠杆菌,不适合营养要求很高的苛养菌,属于富营养型通用培养基。
配制实操步骤
第一步 按配方称量胰蛋白胨、酵母提取物、NaCl,加入蒸馏水溶解。
第二步 用 NaOH 调节 pH 至 7.2 左右。
第三步 需要平板就加入琼脂粉,分装之后高压灭菌。
第四步 灭菌完成,液体培养基直接备用;固体培养基降温至 50℃,按需添加抗生素,倒平板,冷却凝固保存。
第五步 使用前确认无浑浊污染,4℃冷藏保存,尽快用完。
综合来看 LB 培养基就是大肠杆菌实验最经典的富营养培养基,核心三大原料是胰蛋白胨、酵母提取物、氯化钠,液体用于摇菌,加琼脂变成固体平板,抗性筛选需要后期单独加抗生素。
【常见问题】
问题 1 LB 培养基全称是什么
回答 1 LB 培养基全称是 Luria-Bertani 培养基,也常被叫做 Luria Broth 卢里亚肉汤。
问题 2 LB 培养基可以直接筛选抗性菌吗
回答 2 LB 培养基本身没有抗性,不能直接筛选抗性菌,需要灭菌冷却之后额外添加抗生素才可以做抗性筛选。
问题 3 LB 培养基必须高压灭菌吗
回答 3 LB 培养基需要 121℃高压蒸汽灭菌,避免杂菌污染,抗生素不能跟着培养基一起高压灭菌。
问题 4 LB 培养基主要培养什么菌
回答 4 LB 培养基主要用来培养大肠杆菌,属于富营养通用培养基,不适合苛养菌培养。
【免责申明】
本文内容基于微生物实验常规资料整理,仅作为学习参考,实际实验请按照实验室 SOP 规范操作,注意生物安全防护。


