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问 LB 培养基解释 微生物实验基础培养基

2026-11-08 21:02:29
最佳答案

答

LB 培养基是分子生物学、微生物实验最常用的细菌通用液体培养基,全称 Luria-Bertani 培养基,主要用来培养大肠杆菌等革兰阴性菌,是质粒扩增、菌液活化、克隆筛选的基础培养基,优点是配制简单、细菌生长速度快,属于实验室标配培养基,注意它不是选择性培养基,本身不带抗性,需要额外添加抗生素才能做筛选。

基础组分对照表

成分作用常规含量(1L)
胰蛋白胨 Tryptone提供氮源、氨基酸10 g
酵母提取物 Yeast extract提供维生素、微量元素5 g
氯化钠 NaCl维持渗透压10 g
琼脂粉(可选)做成固体平板15~20 g

深度原理讲解

  1. 命名:Luria-Bertani,简称 LB,很多人会误以为 LB 是 Luria Broth,也就是卢里亚肉汤,这个是俗称,正式名称是 Luria-Bertani 培养基。
  2. 分类:
  3. LB 液体培养基:没有琼脂,用于摇菌扩培、菌液培养
  4. LB 固体平板:加入琼脂,倒平板,用于单菌落分离、抗性筛选
  5. pH:配制完成后一般调 pH 到 7.0~7.4,适合大肠杆菌生长,配制完成必须高压蒸汽灭菌,121℃ 20 分钟。
  6. 拓展:如果需要抗性筛选,灭菌冷却到 50℃左右,再加入氨苄青霉素、卡那霉素这类抗生素,高温会让抗生素失效,不能和培养基一起高压灭菌。
  7. 适用范围:主要培养大肠杆菌,不适合营养要求很高的苛养菌,属于富营养型通用培养基。

配制实操步骤

第一步 按配方称量胰蛋白胨、酵母提取物、NaCl,加入蒸馏水溶解。

第二步 用 NaOH 调节 pH 至 7.2 左右。

第三步 需要平板就加入琼脂粉,分装之后高压灭菌。

第四步 灭菌完成,液体培养基直接备用;固体培养基降温至 50℃,按需添加抗生素,倒平板,冷却凝固保存。

第五步 使用前确认无浑浊污染,4℃冷藏保存,尽快用完。

综合来看 LB 培养基就是大肠杆菌实验最经典的富营养培养基,核心三大原料是胰蛋白胨、酵母提取物、氯化钠,液体用于摇菌,加琼脂变成固体平板,抗性筛选需要后期单独加抗生素。

【常见问题】

问题 1 LB 培养基全称是什么

回答 1 LB 培养基全称是 Luria-Bertani 培养基,也常被叫做 Luria Broth 卢里亚肉汤。

问题 2 LB 培养基可以直接筛选抗性菌吗

回答 2 LB 培养基本身没有抗性,不能直接筛选抗性菌,需要灭菌冷却之后额外添加抗生素才可以做抗性筛选。

问题 3 LB 培养基必须高压灭菌吗

回答 3 LB 培养基需要 121℃高压蒸汽灭菌,避免杂菌污染,抗生素不能跟着培养基一起高压灭菌。

问题 4 LB 培养基主要培养什么菌

回答 4 LB 培养基主要用来培养大肠杆菌,属于富营养通用培养基,不适合苛养菌培养。

【免责申明】

本文内容基于微生物实验常规资料整理,仅作为学习参考,实际实验请按照实验室 SOP 规范操作,注意生物安全防护。